Оценка количества митозов и многоядерных клеток опухоли при ВПЧ-ассоциированной и ВПЧ-независимой карциноме вульвы

Плоскоклеточные карциномы вульвы подразделяются на ассоциированные с вирусом папилломы человека (ВПЧ) и ВПЧ-независимые. Малоизученным остается вопрос о механизмах кацерогенеза данной локализации. Цель исследования – сравнить митотическую активность и количество многоядерных опухолевых клеток при ВПЧ-ассоциированной и ВПЧ-независимой карциноме вульвы. Материал и методы. В исследование ретроспективно включены 74 пациентки с впервые выявленной плоскоклеточной карциномой вульвы. Проводилось иммуногистохимическое исследование и типирование вируса методом полимеразной цепной реакции. Подсчет количества митозов (нормальных и патологических), а также многоядерных клеток проводился при ув. 400× в 20 полях зрения. Проводили оценку параметров в 74 образцах карцином, а также в участках нормальной ткани вне опухоли (n=18). Результаты. Частота встречаемости ВПЧ-ассоциированной карциномы вульвы составила 28,4% (n=21). ВПЧ- независимая карцинома выявлена в 53 случаях (71,6%). Пациентки с ВПЧ-ассоциированной карциномой вульвы были моложе (65 [57; 76] лет), чем пациентки с ВПЧ- независимой карциномой (75 [68; 72] лет). ВПЧ-ассоциированные опухоли в 71,4% случаев были диагностированы на более ранних стадиях заболевания (I–II стадия) по сравнению с ВПЧ-независимой карциномой вульвы (I–II стадия в 47% случаев). Общее количество митозов было статистически значимо выше при ВПЧ-ассоциированной карциноме (37 [31,25; 46,00]) по сравнению с ВПЧ-независимой карциномой (16,5 [12,00; 24,25]) и клетками нормальной ткани (2,0 [1,00; 3,00]). Количество атипичных фигур митоза статистически значимо чаще обнаруживалось в опухолевых клетках ВПЧ-ассоциированной карциномы (15,5 [10,00; 20,00]). Количество двуядерных или многоядерных опухолевых клеток было ниже при ВПЧ-независимом канцерогенезе (4,0 [2,00; 8,25]) по сравнению с вирус-ассоциированной опухолью (24,5 [23,25; 32,75]). ВПЧ-ассоциированные митозы обнаружены в 85,7% (n=18) образцах ВПЧ-ассоциированной карциномы вульвы. Заключение. Воздействие ВПЧ на эпителиальные клетки приводит к митотическим дефектам и возникновению многоядерных клеток опухоли. Для ВПЧ-ассоциированного канцерогенеза характерно наличие атипичных митозов, представляющие дополнительные палочки или точки хромосом вне основной митотической фигуры. Возникающая хромосомная нестабильность клеток и нарушение репарации ДНК может быть причиной лучшего ответа на радиационное лечение пациенток с ВПЧ-ассоциированными опухолями.

1. Ershov V.A. Kontseptsii geneza vpch-assotsiirovannoi tservikal'noi neoplazii. Novosti klinicheskoi tsitologii Rossii. 2021;25(1):20-29. (In Russ.) doi: 10.24412/1562-4943-2021-1-0004.

2. Cosper PF, Hrycyniak LCF, Paracha M, Lee DL, Wan J, Jones K, Bice SA, Nickel K, Mallick S, Taylor AM, Kimple RJ, Lambert PF, Weaver BA. HPV16 E6 induces chromosomal instability due to polar chromosomes caused by E6AP-dependent degradation of the mitotic kinesin CENP-E. Proc Natl Acad Sci U S A. 2023 Apr 4;120(14):e2216700120. doi: 10.1073/pnas.2216700120.

3. de Martel C, Georges D, Bray F, Ferlay J, Clifford GM. Global burden of cancer attributable to infections in 2018: a worldwide incidence analysis. Lancet Glob Health. 2020 Feb;8(2):e180-e190. doi: 10.1016/S2214-109X(19)30488-7.

4. Dohopolski MJ, Horne ZD, Pradhan D, Bhargava R, Edwards RP, Kelley JL, Comerci JT, Olawaiye AB, Courtney-Brooks M, Berger JL, Sukumvanich P, Beriwal S. The Prognostic Significance of p16 Status in Patients With Vulvar Cancer Treated With Vulvectomy and Adjuvant Radiation. Int J Radiat Oncol Biol Phys. 2019 Jan 1;103(1):152-160. doi: 10.1016/j.ijrobp.2018.08.014.

5. Galluzzi L, Aaronson SA, Abrams J, Alnemri ES, Andrews DW, Baehrecke EH, et al. Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring cell death in higher eukaryotes. Cell Death Differ. 2009 Aug;16(8):1093-107. doi: 10.1038/cdd.2009.44.

6. Jones KM, Bryan A, McCunn E, Lantz PE, Blalock H, Ojeda IC, Mehta K, Cosper PF. The Causes and Consequences of DNA Damage and Chromosomal Instability Induced by Human Papillomavirus. Cancers (Basel). 2024 Apr 25;16(9):1662. doi: 10.3390/cancers16091662.

7. Kortekaas KE, Bastiaannet E, van Doorn HC, de Vos van Steenwijk PJ, Ewing-Graham PC, Creutzberg CL, Akdeniz K, Nooij LS, van der Burg SH, Bosse T, van Poelgeest MIE. Vulvar cancer subclassification by HPV and p53 status results in three clinically distinct subtypes. Gynecol Oncol. 2020 Dec;159(3):649-656. doi: 10.1016/j.ygyno.2020.09.024.

8. Lee LJ, Howitt B, Catalano P, Tanaka C, Murphy R, Cimbak N, DeMaria R, Bu P, Crum C, Horowitz N, Matulonis U, Viswanathan AN. Prognostic importance of human papillomavirus (HPV) and p16 positivity in squamous cell carcinoma of the vulva treated with radiotherapy. Gynecol Oncol. 2016 Aug;142(2):293-8. doi: 10.1016/j.ygyno.2016.05.019.

9. Lin HH, Hsu HL, Yeh NH. Apoptotic cleavage of NuMA at the C-terminal end is related to nuclear disruption and death amplification. J Biomed Sci. 2007 Sep;14(5):681-94. doi: 10.1007/s11373-007-9165-3.

10. Mittal S, Banks L. Molecular mechanisms underlying human papillomavirus E6 and E7 oncoprotein-induced cell transformation. Mutat Res Rev Mutat Res. 2017 Apr-Jun;772:23-35. doi: 10.1016/j.mrrev.2016.08.001.

11. Rasmussen CL, Sand FL, Hoffmann Frederiksen M, Kaae Andersen K, Kjaer SK. Does HPV status influence survival after vulvar cancer? Int J Cancer. 2018 Mar 15;142(6):1158-1165. doi: 10.1002/ijc.31139.

12. Scurry J, Baskota SU. HPV-Associated Atypical Mitotic Figures in Squamous Intraepithelial Lesions of the Lower Female Genital Tract. J Low Genit Tract Dis. 2016 Apr;20(2):165-8. doi: 10.1097/LGT.0000000000000172.

13. Shirnekhi HK, Kelley EP, DeLuca JG, Herman JA. Spindle assembly checkpoint signaling and sister chromatid cohesion are disrupted by HPV E6-mediated transformation. Mol Biol Cell. 2017 Jul 15;28(15):2035-2041. doi: 10.1091/mbc.E16-12-0853.

14. Vidi PA, Chandramouly G, Gray M, Wang L, Liu E, Kim JJ, Roukos V, Bissell MJ, Moghe PV, Lelièvre SA. Interconnected contribution of tissue morphogenesis and the nuclear protein NuMA to the DNA damage response. J Cell Sci. 2012 Jan 15;125(Pt 2):350-61. doi: 10.1242/jcs.089177.

15. Yap ML, Allo G, Cuartero J, Pintilie M, Kamel-Reid S, Murphy J, Mackay H, Clarke B, Fyles A, Milosevic M. Prognostic Significance of Human Papilloma Virus and p16 Expression in Patients with Vulvar Squamous Cell Carcinoma who Received Radiotherapy. Clin Oncol (R Coll Radiol). 2018 Apr;30(4):254-261. doi: 10.1016/j.clon.2018.01.011.

16. Ye J, Zheng L, He Y, Qi X. Human papillomavirus associated cervical lesion: pathogenesis and therapeutic interventions. MedComm (2020). 2023 Sep 14;4(5):e368. doi: 10.1002/mco2.368.

17. Zhang J, Zhang Y, Zhang Z. Prevalence of human papillomavirus and its prognostic value in vulvar cancer: A systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2018 Sep 26;13(9):e0204162. doi: 10.1371/journal.pone.0204162.

18. Zhou C., Tuong Z.K., Frazer I.H. Papillomavirus Immune Evasion Strategies Target the Infected Cell and the Local Immune System. Front Oncol. 2019; 9: 682. DOI: 10.3389/fonc.2019.00682.

19. Zięba S, Chechlińska M, Kowalik A, Kowalewska M. Genes, pathways and vulvar carcinoma - New insights from next-generation sequencing studies. Gynecol Oncol. 2020 Aug;158(2):498-506. doi: 10.1016/j.ygyno.2020.05.034