Динамика экспрессии белков-маркеров клеточной гибели в посттравматическом гистогенезе соединительных тканей кожи

Цель исследования – c помощью метода иммуногистохимии оценить динамику экспрессии белков р53, casp3, bcl-2 в соединительнотканных клетках кожи крыс на этапах посттравматического гистогенеза. Материал и методы. Эксперимент выполнен на крысах-самцах линии Wistar (n=40) массой тела 200–230 г, которым в области средней трети бедра острым скальпелем была нанесена глубокая поперечная резаная рана кожи. Взятие материала проводили через 12 ч, 24 ч, 2, 3, 6, 10, 15 и 25 суток после нанесения травмы, по 5 животных на каждый срок. Контрольную группу составили 5 интактных животных. Иммуногистохимически выявляли экспрессию р53, casp3, bcl-2. Результаты обрабатывали методами параметрической статистики. Результаты. При механическом повреждении соединительных тканей кожи (рыхлой и плотной неоформленной соединительной ткани в составе дермы и гиподермиса, а также жировой ткани в составе гиподермиса) в перинекротической области раны активируются закономерные гистогенетические процессы, к которым относится программируемая клеточная гибель. Установлены особенности экспрессии белков р53, casp3, bcl-2. Выявлено динамическое соотношение экспрессируемых белков-маркеров апоптотической клеточной гибели в некротическую и воспалительную фазы раневого процесса, а также в пролиферативную, дифференцировочную и адаптивную фазы регенерационного гистогенеза. Заключение. Соотношение количества клеток, экспрессирующих белки р53, casp3 и bcl-2, изменяется в зависимости от фазы раневого процесса. Максимальное содержание casp3- позитивных клеток выявлено в фазу воспаления, на 2-е сутки и в фазу дифференцировки тканевых элементов, на 10-е сутки. Максимальное содержание р53-иммунопозитивных клеток выявлено в фазу воспаления, через 24 ч и на 3-и сутки, а также в фазу регенерационного гистогенеза, на 15-е сутки. Резкое увеличение количества bcl-2-позитивных клеток регистрируется через 24 ч, 6 и 15 суток после травмы.

1. Данилов Р.К. Раневой гистогенез: гистогенетические основы. СПб.: ВМедА; 2008. 379.

2. Данилов Р.К., Мурзабаев Х.Х., Графова Г.Я. Морфофункциональная характеристика клеточной гибели в эпидермисе при огнестрельном ранении в эксперименте. Морфология. 2001;5:71-75.

3. Даренская А.Д., Доброва Н.В., Степанова Е.В. Молекулярно-биологический маркер Вах при колоректальном раке: характеристика, роль в механизмах регуляции апоптоза, влияние на прогноз (обзор литературы). Онкологическая колопроктология. 2019;9(1):19–25.

4. Деев Р.В., Билялов А.И., Жампеисов Е.М. Современные представления о клеточной гибели. Гены и клетки. 2018;13(1):6-19. doi: 10.23868/201805001.

5. Ивина А.А., Семкин В.А., Хабадзе З.С., Бабиченко И.И. Иммуногистохимическое исследование экспрессии белков Ki-67, PHH3 и CK15 при малигнизации эпителия слизистой оболочки рта. Архив патологии. 2019;81(5):30-34.

6. Кабетенова А.А., Хусаинова Э., Мухамедиева Е., Маншарипова А.Т. Изучение и визуализация программированной клеточной гибели. Фундаментальная наука в современной медицине 2017: материалы дистанционной научно-практической конференции студентов и молодых ученых. 3 марта 2017. Минск; 2017:138-141.

7. Коржевский Д. Э., Кирик О.В., Карпенко М.Н. Григорьев И.П., Сухорукова Е.Г., Колос Е.А., Гиляров А.В. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии: Руководство. СПб : СпецЛит; 2014. 119.

8. Моргун Е.И., Роговая О.С., Воротеляк Е.А. Модель ишемизированной длительно незаживающей кожной раны: клеточная гибель и механизмы ранозаживления. Современные технологии в медицине. 2018;10(4):69-77 doi: 10.17691/stm2018.10.4.08.

9. Новиков В.С., Шустов Е.Б. Современные представления о механизмах клеточной гибели. Вестник образования и развития науки Российской академии естественных наук. 2021;25(4):15–27. doi: 10.26163/RAEN.2021.20.91.002. 10.

10. Одинцова И.А., Данилов Р.К., Русакова С.Э., Комарова А.С. Механизмы гибели тканевых элементов после травмы. Вестник Российской Военно-медицинской академии. 2015;2(50):112-113.

11. Сергеева Т.Ф., Ширманова М.В., Загайнова Е.В., Лукьянов К.А. Современные методы исследования апоптотической гибели клеток. Современные технологии в медицине.2015;7(3):172-182.

12. Чирский В.С., Одинцова И.А., Андреева Е.А., Слуцкая Д.Р. Формы клеточной гибели при раневом сепсисе. СПб.: ВМедА; 2024. 28.

13. Шестель И.В., Пикиреня И.И. Иммуногистохимические маркеры процессов репаративной регенерации кожных ран. Хирургия. Восточная Европа. 2023;12(1):102-113.

14. Darby IA, Laverdet B, Bonté F, Desmoulière A. Fibroblasts and myofibroblasts in wound healing. Clin Cosmet Investig Dermatol. 2014 Nov 6;7:301-11. doi: 10.2147/CCID.S50046.

15. Doersch KM, DelloStritto DJ, Newell-Rogers MK. The contribution of interleukin-2 to effective wound healing. Exp Biol Med (Maywood). 2017 Feb;242(4):384-396. doi: 10.1177/1535370216675773.

16. Galluzzi L, Vitale I, Aaronson SA, Abrams JM, Adam D, Agostinis P, et al. Molecular mechanisms of cell death: recommendations of the Nomenclature Committee on Cell Death 2018. Cell Death Differ. 2018 Mar;25(3):486-541. doi: 10.1038/s41418-017-0012-4.

17. Johnson BZ, Stevenson AW, Prêle CM, Fear MW, Wood FM. The Role of IL-6 in Skin Fibrosis and Cutaneous Wound Healing. Biomedicines. 2020 Apr 30;8(5):101. doi: 10.3390/biomedicines8050101.

18. Maddaluno L, Urwyler C, Werner S. Fibroblast growth factors: key players in regeneration and tissue repair. Development. 2017 Nov 15;144(22):4047-4060. doi: 10.1242/dev.152587.

19. Salmon-Ehr V, Ramont L, Godeau G. Implication of Interleukin-4 in Wound Healing. Lab. Invest. 2000;80(8):1337-43. doi: 10.1038/labinvest.3780141.

20. Tobias MN. Cell Death. Autophagy, Apoptosis and Necrosis. South Africa: IntechOpen, 2015. 446. doi: 10.5772/59648