Морфологические изменения в клетках протоковой аденокарциномы поджелудочной железы при эпителиально-мезенхимальном переходе

Цель исследования – изучить экспрессию генов-маркеров эпителиально-мезенхимального перехода в протоковой аденокарциноме поджелудочной железы.

Материал и методы. Операционный материал от 44 пациентов с протоковой аденокарциномой поджелудочной железы подвергался морфологическому анализу с молекулярно-генетическим исследованием. В обнаруженных участках анапластического компонента выявляли суммарную РНК с помощью набора RNeasy Mini Kit (Qiagen, Германия). Для молекулярно-генетического исследования эпителиальномезенхимального перехода (ЭМП) использовали 5 генов-маркеров: ZEB1, ZEB2, CDH1, VIM, SNAIL1 (SLUG). Измерение экспрессии генов проводили в 3 разовом повторении, используя интеркалирующий краситель EvaGreen. На серийных парафиновых срезах с применением технологии tissue microarrays, проводили иммуногистохимическое выявление р63, гладкомышечного актина, общего цитокератина, цитокератина 7, виментина, Е-кадгерина (Ventana).

Результаты. В результате проведенного исследования в клетках анапластического компонента выявлена положительная реакция с мезенхимальными маркерами (виментин, р63, гладкомышечный актин), в отличие от железистого компонента. При молекулярном исследовании анапластического компонента изменения экспрессии генов характеризовались как ЭМП-положительные.

Заключение. Гетерогенность протокового рака проявляется в появлении анапластического (саркомоподобного) компонента, в котором прослеживается способность эпителиальных опухолевых клеток приобретать свойство мезенхимальных клеток, не требующих стромы и обладающих агрессивным злокачественным потенциалом, влияющем на выживаемость больных.

1. Паклина О.В., Сетдикова Г.Р. Методология исследования операционного материала при протоковом раке поджелудочной железы. Клиническая и экспериментальная морфология. 2014; 1:42–50

2. Шубин В.П., Шелыгин Ю.А., Сушков О.И., Цуканов А.С. Роль эпителиальномезенхимального перехода в развитии колоректального рака (обзор литературы). Колопроктология. 2018; 2:111–7

3. Bosman FT. World Health Organization. WHO classification of tumours of the digestive system. Lyon: Iarc Press; 2010.

4. Fujita H, Ohuchida K, Mizumoto K, Nakata K, Yu J, Kayashima T, et al. α-Smooth Muscle Actin Expressing Stroma Promotes an Aggressive Tumor Biology in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma. Pancreas. 2010 Nov;39(8):1254–62. DOI: 10.1097/mpa.0b013e3181dbf647

5. Gao Q, Liang W-W, Foltz SM, Mutharasu G, Jayasinghe RG, Cao S, et al. Driver Fusions and Their Implications in the Development and Treatment of Human Cancers. Cell Reports. 2018 Apr;23(1):227–238.e3. DOI: 10.1016/j.celrep.2018.03.050

6. Kabashima-Niibe A, Higuchi H, Takaishi H, Masugi Y, Matsuzaki Y, Mabuchi Y, et al. Mesenchymal stem cells regulate epithelial-mesenchymal transition and tumor progression of pancreatic cancer cells. Cancer Science. 2013 Jan 11;104(2):157–64. DOI: 10.1111/cas.12059

7. Kadaba R, Birke H, Wang J, Hooper S, Andl CD, Di Maggio F, et al. Imbalance of desmoplastic stromal cell numbers drives aggressive cancer processes. The Journal of Pathology. 2013 Mar 21;230(1):107–17. DOI: 10.1002/path.4172

8. Müerköster S, Wegehenkel K, Arlt A, Witt M, Sipos B, Kruse M-L, et al. Tumor Stroma Interactions Induce Chemoresistance in Pancreatic Ductal Carcinoma Cells Involving Increased Secretion and Paracrine Effects of Nitric Oxide and Interleukin1β. Cancer Research. 2004 Feb 15;64(4):1331–7. DOI: 0.1158/0008-5472.can-031860

9. Raphael BJ, Hruban RH, Aguirre AJ, Moffitt RA, Yeh JJ, Stewart C, et al. Integrated Genomic Characterization of Pancreatic Ductal Adenocarcinoma. Cancer Cell. 2017 Aug;32(2):185–203.e13. DOI: 10.1016/j.ccell.2017.07.007

10. Rhim AD, Mirek ET, Aiello NM, Maitra A, Bailey JM, McAllister F, et al. EMT and Dissemination Precede Pancreatic Tumor Formation. Cell. 2012 Jan;148(1–2):349–61. DOI: 10.1016/j.cell.2011.11.025

11. Savagner P. Leaving the neighborhood: molecular mechanisms involved during epithelialmesenchymal transition. BioEssays. 2001;23(10):912–23. DOI: 10.1002/bies.1132

12. Thiery JP. Epithelial-mesenchymal transitions in tumour progression. Nature Reviews Cancer. 2002 Jun;2(6):442–54. DOI: 10.1038/nrc822

13. Yen TWF, Aardal NP, Bronner MP, Thorning DR, Savard CE, Lee SP, et al. Myofibroblasts are responsible for the desmoplastic reaction surrounding human pancreatic carcinomas. Surgery. 2002 Feb;131(2):129–34. DOI: 10.1067/msy.2002.119192