Влияние холестаза на холинергические нейроны поясной коры головного мозга крыс

Холестаз, характеризующийся застоем желчи в печени и затруднением выведения ее в кишечник, вызывает нарушение пищеварения и поступление токсических компонентов желчи в кровь и головной мозг. Исследование влияния холестаза на холинергические нейроны поясной коры головного мозга крыс позволяет понять механизмы патологических изменений в мозге. Целью исследования явилось изучение влияния холестаза на холинергические нейроны поясной коры головного мозга крыс. Материал и методы. В работе использовано 72 беспородные белые крысы-самца массой 225±25 г. Подпеченочный холестаз моделировали по методу Л.С. Кизюкевича. Животным контрольной группы проводили ложную операцию. Крыс контрольной и опытной группы декапитировали на 2-, 5-, 10-, 20-, 45-е и 90-е сутки. Для исследования брали фрагменты больших полушарий головного мозга, заключали в парафин и изготавливали фронтальные срезы толщиной 5 мкм, с окрашиванием антителами к белку холинацетилтрансферазы (ХАТ). Исследовали нейроны поясной коры мозга крыс. Подсчитывали количество холинергических нейронов, а также цитофотометрически оценивали относительное содержание ХАТ в их цитоплазме. Данные подвергались статистической обработке. Результаты. Установлено, что в норме в мелкоклеточном слое поясной коры количество холинергических нейронов больше, чем в крупноклеточном слое. Содержание ХАТ в цитоплазме перикарионов нейронов мелкоклеточного слоя через 5 и 10 суток после холестаза снижается. При продолжении холестаза (на 10-е и 20-е сутки после операции) количество холинергических нейронов в мелкоклеточном слое поясной коры уменьшается, что свидетельствует об их гибели. Содержание ХАТ в цитоплазме нейронов крупноклеточного слоя снижается только к 10-м суткам холестаза. При этом максимальная гибель холинергических нейронов выявляется на 45-е сутки. Холинергические нейроны мелкоклеточного слоя быстрее реагируют на холестаз и сохранившиеся нейроны раньше нормализуются после его устранения, по сравнению с нейронами крупноклеточного слоя поясной коры. Заключение. Уменьшение содержания ХАТ, указывающее на нарушение синтеза ацетилхолина и потеря холинергических нейронов в поясной коре могут лежать в основе когнитивного дефицита, наблюдаемого у пациентов с холестазом.

1. Банин В.В., Быков В.Л. Terminologia Histologica. Международные термины по цитологии и гистологии человека с официальным списком русских эквивалентов. М. ГЭОТАР-Медиа; 2009. 272.

2. Вахрушев Я.М., Хохлачева Н.А. Желчнокаменная болезнь: эпидемиология, факторы риска, особенности клинического течения, профилактика. Архив внутренней медицины. 2016;6(3):30–35. doi: 10.20514/2226-6704-2016-6-3-30-35.

3. Дзяк Л.А., Цуркаленко Е.С. Роль холинергического дефицита в патогенезе психоневрологических заболеваний. Международный неврологический журнал. 2019;3(105):39-47. doi:10.22141/2224-0713.3.105.2019.169917.

4. Емельянчик С.В., Карнюшко О.А. Зиматкин С.М. Cостояние митохондрий в клетках Пуркинье мозжечка крысы при холестазе. Клиническая и экспериментальная морфология. 2019;8(2):41-47. doi:10.31088/2226-5988-2019-30-2-41-47.

5. Зиматкин С.М., Емельянчик С.В. Нейроны мозга при нарушениях циркуляции желчи. Гродно : ГрГМУ; 2021, 368.

6. Каркищенко В.Н., Фокин Ю.В., Люблинский С.Л., Помыткин И.А., Алимкина О.В., Табоякова Л.А., Капцов А.В., Борисова М.М., Каркищенко Н.Н. Центральные механизмы липосомированных форм ацетилхолина и инсулина посредством анализа когнитивных, психоэмоциональных и поведенческих параметров крыс. Биомедицина. 2022;18(1):32–55. doi:10.33647/2074-5982-18-1-32-55.

7. Кизюкевич Л.С. Причины развития полиорганной недостаточности при хирургической патологии желчевыводящих путей. Вести Национальной академии наук Беларуси. Серия медицинские науки. 2005;2:118–121.

8. Кизюкевич Л.С. Реактивные изменения в почках при экспериментальном холестазе. Гродно: ГрГМУ; 2005, 239.

9. Климуть Т.В., Заерко А.В., Емельянчик С.В., Зиматкин С.М. АТФ-синтаза в нейронах поясной коры мозга крыс при подпеченочном холестазе. Клиническая и экспериментальная морфология. 2025;14 (1):54–61. doi: 10.31088/CEM2025.14.1.54-61.

10. Климуть Т.В., Заерко А.В., Емельянчик С.В., С.М. Зиматкин. Изменения хроматофилии цитоплазмы и содержания РНК в нейронах поясной коры мозга крыс при подпеченочном холестаза. Морфология. 2024;162(1):41-53. doi: 10.17816/morph.629000.

11. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П., Отеллин В.А. Применение обезвоживающих фиксаторов, содержащих соли цинка, в нейрогистологических исследованиях. Морфология. 2006;129(1):85–86.

12. Кудрявцева В.А., Кузьмин Е.А., Моисеева А.В., Обельчакова М.С., Синицына П.А., Филистович Т.И., Карташкина Н.Л., Пьявченко Г.А., Голубев А.М., Кузнецов С.Л. Молекулярные и морфологические маркеры гибели нейронов при острых нарушениях мозгового кровообращения. Сеченовский вестник. 2022;13(4): 18–32. doi: 10.47093/2218-7332.2022.13.4.18-32.

13. Мажирина К.Г., Первушина О.Н., Федоров А.А., Штарк М.Б. Нейровизуализация и феномен морального выбора. Успехи физиологических наук. 2021;52(1):16–30. doi: 10.31857/S0301179821010057.

14. Омельченко В.П, Демидова А.А. Информатика, медицинская информатика, статистика. Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2021. 608.

15. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии : руководство. Под ред. Д. Э. Коржевский. 2-е изд., испр. и доп. СПб. : СпецЛит; 2014. 119.

16. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes : text with EEA relevance 20.10.2010. Strasbourg : Official Journal of the European Union. 2010. 46.

17. Esfahani DE, Zarrindast MR. Cholestasis and behavioral disorders. Gastroenterol Hepatol Bed Bench. 2021;14(2):95-107. doi: 10.33647/2074-5982-18-1-32-55.

18. Hosseini N, Nasehi M, Radahmadi M, Zarrindast M-R. Effects of CA glutamatergic systems upon memory impairments in cholestatic rats. Behavioural Brain Research. 2013;256:636–18. doi: 10.1016/j.bbr.2013.08.018.

19. Huang LT, Chen CC, Sheen JM, Chen YJ, Hsieh CS, Tain YL. The interaction between high ammonia diet and bile duct ligation in developing rats: Assessment by spatial memory and asymmetric dimethylarginine. Int J. Dev Neurosci. 2010;28:169–74. doi: 10.1016/j.ijdevneu.2009.11.006.

20. Huang LT, Tiao MM, Tain YL, Chen CC, Hsieh CS. Melatonin ameliorates bile duct ligation-induced systemic oxidative stress and spatial memory deficits in developing rats. Pediatr Res. 2009;65:176–80. doi: 10.1203/PDR.0b013e31818d5bc7.

21. Paxinos G, Watson C. The rat brain in stereotaxic coordinates. London: Academic Press; 2007. 448.