Preview

Журнал анатомии и гистопатологии

Расширенный поиск

Молекулярно-генетические аспекты оптимизирующего влияния окситоцина на репаративные процессы эпителиальных и стромальных структур роговицы глаза кроликов

https://doi.org/10.18499/2225-7357-2019-8-4-53-59

Полный текст:

Аннотация

Цель – определить регенераторное влияние окситоцина на экспрессию генов PAX6, MKI67, TAB3, соответственно, при экспериментальной эрозии роговицы.

Материал  и методы. Сформировано  3 группы  экспериментальных  животных  (n=6). 1-й и 2-й группе выполнена эрозия роговицы диаметром 8 мм. 3-я группа контрольная – без повреждения роговицы. 1-й группе (n=2) инстиллировали в конъюнктивальный мешок антибиотик ципромед 0.3%; 2-й группе (n=2) – окситоцин 5 МЕ и ципромед 0.3%. У всех животных забирали образцы переднего эпителия и стромы на 4-е и 8-е сутки эксперимента, изготавливали гистологические препараты. Из образцов выделяли мРНК, относительное содержание которой оценивали методом электрофореза. Обратной транскрипцией получали кДНК. По результатам real-time PCR оценивали экспрессию изучаемых генов.

Результаты. Экспрессию целевых генов PAX6, MKI67, TAB3 нормализовали относительно генов «домашнего хозяйства» HPRT и RPL5 в программе REST. Окситоцин стимулировал усиление экспрессии гена MKI67 в строме (в 2.3 раза на 4-е сутки) с последующей нормализацией на 8-е сутки. Гены PAX6 и TAB3, напротив, снижали свою экспрессию под действием окситоцина. В эпителии на 8-е сутки под действием окситоцина возрастала экспрессия гена PAX6 (в 2.1 раза), при этом экспрессия генов MKI67 и TAB3 по сравнению с контролем практически не изменялась (0.72 и 1.1 раз, соответственно).

Заключение. Установлен  новый механизм воздействия  окситоцина  на процесс восстановления роговицы  при  ее  повреждении,  заключающийся  в  дифференциальной  стимуляции  экспрессии  генов MKI67 и PAX6, участвующих в регенерации стромы и эпителия роговицы, соответственно.

Об авторах

А. Д. Чупров
Оренбургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России
Россия

Чупров Александр Дмитриевич.

ул. Салмышская, 17, Орунбург, 460047.



А. А. Стадников
Оренбургский государственный медицинский университет Минздрава России
Россия
Оренбург.


Д. В. Олейник
Оренбургский филиал ФГАУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России
Россия

ул. Салмышская, 17, Орунбург, 460047.



Н. Е. Гоголева
Казанский институт биохимии и биофизики ФИЦ «Казанский научный центр Российской академии наук»
Россия

Казань.



А. О. Плотников
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук
Россия

Оренбург.



А. А. Миронычева
Казанский институт биохимии и биофизики ФИЦ «Казанский научный центр Российской академии наук»
Россия

Казань.



С. В. Черкасов
Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза Уральского отделения Российской академии наук
Россия

Оренбург.



Список литературы

1. Бабиченко И.И., Ковязин В.А. Новые методы иммуногистохимической диагностики опухолевого роста. М.: Изд-во РУДН; 2008. 109

2. Бухарин О.В. Гормоны задней доли гипофиза окситоцин и вазопрессин как медиаторы иммуногенеза. В кн: Морфогенез и регенерация покровных и железистых эпителиев в онтогенезе и в условиях эксперимента. Оренбург. 1981: 59–64

3. Гавриленко В.Г., Есипов В.К., Сивожелезов К.Г. Морфологическая характеристика раневого процесса у больных с диабетическими гнойно-некротическими поражениями стоп при воздействии окситоцином. Морфология. 2003; 5: 24–28

4. Гололобов В.Г., Гайворонский И.В., Деев Р.В., Рудько А.С., Эллиниди В.Н., Аникеева Н.В., Сухинин М.В. Репаративная регенерация многослойного эпителия роговицы: биотехнологический потенциал. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. 2008; 4(3):55–9

5. Горбунов А.А., Канюков В.Н., Стадников А.А. Реактивность и пластичность тканей конъюнктивы в условиях ее механической травматизации и экзогенного введения окситоцина: материалы VII всероссийской конференции «Нейроэндокринология-2005». С.-Петербург; 2005:166–7

6. Курлаев П.П., Зак В.И. Применение окситоцина в комбинации с антибиотиками при лечении больных с лактационным маститом. Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. 1988; 4:58–61

7. Скоробогатых Ю.И., Перунова Н.Б., Курлаев П.П., Бухарин О.В. Экспериментальное изучение комбинации ципрофлоксацина с окситоцином на образование биопленок условно патогенными бактериями. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2010; 6:3–7

8. Стадников А.А., Бухарин О.В. Гипоталамическая нейросекреция и структурно-функциональный гомеостаз про- и эукариот (морфологические основы реактивности, пластичности и регенерации). Оренбург: ОрГМА; 2012. 207

9. Стадников Б.А., Шеина Е.А. Влияние гипоталамических нонапептидов на регенерацию панкреатоцитов при остром экспериментальном панкреатите. Актуальные вопросы военной и практической медицины: сборник трудов. Оренбург; 2002. 168–69

10. Close JL, Gumuscu В, Reh T. Retinal neurons regulate proliferation of postnatal progenitors and Muller glia in the rat retina via TGF signaling. Development. 2005 Jul 1;132(13):3015–26. doi: 10.1242/dev.01882

11. Cvekl A, Piatigorsky J. Lens development and crystallin gene expression: many roles for Pax-6. BioEssays. 1996 Aug;18(8):621–30. doi: 10.1002/bies.950180805

12. Du Y, Funderburgh ML, Mann MM, SundarRaj N, Funderburgh JL. Multipotent Stem Cells in Human Corneal Stroma. Stem Cells. 2005 Oct;23(9):1266–75. doi: 10.1634/stemcells.2004-0256

13. Hanna C, Bicknell DS, O'Brien JE. Cellturnover in the adult human eye. Arch Ophthalmol. 1961; 65:695–703.

14. Hsieh Y-W, Zhang X-M, Lin E, Oliver G, Yang X-J. The Homeobox Gene Six3 Is a Potential Regulator of Anterior Segment Formation in the Chick Eye. Developmental Biology. 2002 Aug;248(2):265–80. doi: 10.1006/dbio.2002.0732

15. García-Villegas R, Escamilla J, Sánchez-Guzmán E, Pastén A, Hernández-Quintero M, Gómez-Flores E, et al. Pax-6 is expressed early in the differentiation of a corneal epithelial model system. Journal of Cellular Physiology. 2009 Aug;220(2):348–56. doi: 10.1002/jcp.21771

16. Maeng Y-S, Lee G-H, Lee B, Choi S-I, Kim T, Kim EK. Role of TGFBIp in Wound Healing and Mucin Expression in Corneal Epithelial Cells. Yonsei Medical Journal. 2017;58(2):423–31. doi: 10.3349/ymj.2017.58.2.423

17. Pfaffl MW, Horgan GW, Dempfle L. Relative Expression Software Tool (REST) for group-wise comparison and statistical analysis of relative expression results in Real-Time PCR. Nucleic Acids Research. 2002; 30(9):36. doi: 10.1093/nar/30.9.e36

18. Polisetty N, Fatima A, Madhira SL, Sangwan VS, Vemuganti GK. Mesenchymal cells from limbal stroma of human eye. Molecular Vision. 2008 Mar 4;14:431–42.

19. Ren S, Zhang F, Li C, Jia C, Li S, Xi H, Zhang H, Yang L, Wang Y. Selection of housekeeping genes for use in quantitative reverse transcription PCR assays on the murine cornea. Molecular Vision. 2010 Jun 11;16:1076–86.

20. Zhao S, Chen Q, Hung F, Overbeek P. BMP signaling is required for development of the ciliary body. Development. 2002 Oct;129(19):4435–42.


Рецензия

Для цитирования:


Чупров А.Д., Стадников А.А., Олейник Д.В., Гоголева Н.Е., Плотников А.О., Миронычева А.А., Черкасов С.В. Молекулярно-генетические аспекты оптимизирующего влияния окситоцина на репаративные процессы эпителиальных и стромальных структур роговицы глаза кроликов. Журнал анатомии и гистопатологии. 2019;8(4):53-59. https://doi.org/10.18499/2225-7357-2019-8-4-53-59

For citation:


Chuprov A.D., Stadnikov A.A., Oleinik D.V., Gogoleva N.E., Plotnikov A.O., Mironycheva A.A., Cherkasov S.V. Molecular Genetic Aspects of the Optimizing Effect of Oxytocin on the Reparative Processes of Rabbit Eye Corneal Epithelial and Stromal Structures. Journal of Anatomy and Histopathology. 2019;8(4):53-59. (In Russ.) https://doi.org/10.18499/2225-7357-2019-8-4-53-59

Просмотров: 324


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2225-7357 (Print)