anatomyЖурнал анатомии и гистопатологииJournal of Anatomy and Histopathology2225-7357N.N. Burdenko Voronezh State Medical University10.18499/2225-7357-2024-13-4-55-60anatomy-2026Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL PAPERSМетод полуколичественной иммуногистохимической оценки регуляторного белка PDCD4 для изучения его роли в канцерогенезеSemi-Quantitative Method of Immunohistochemical Evaluation of the PDCD4 Regulatory Protein to Study its Role in Carcinogenesishttps://orcid.org/0000-0003-1834-3629РубцовВ. А.RubtsovV. A.

Рубцов Вячеслав Александрович – канд. мед. наук, доцент кафедры патологической анатомии

ул. Ленина, 12, Омск, 644099

Vyacheslav A. Rubtsov – Cand. Sci. (Med.), Associate Professor of Pathological Anatomy Department

ul. Lenina, 12, Omsk, 644099

ogmapath@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8006-3260ПарыгинаМ. Н.ParyginaM. N.

Парыгина Мария Николаевна – канд. мед. наук, доцент кафедры патологической анатомии

Омск

Mariya N. Parygina – Cand. Sci. (Med.), Associate Professor of Pathological Anatomy Department

 Omsk

https://orcid.org/0000-0002-9857-1674ПоморгайлоЕ. Г.PomorgailoE. G.

Поморгайло Елена Геннадьевна – д-р. биол. наук, профессор кафедры патологической анатомии

Омск

Elena G. Pomorgailo – Doct. Sci. (Biol.), Professor of Pathological Anatomy Department

Omsk

https://orcid.org/0000-0003-0949-8709ШиманскаяА. Г.ShimanskayaA. G.

Шиманская Анна Геннадьевна – канд. мед. наук, доцент кафедры патологической анатомии

Омск

Anna G. Shimanskaya – Cand. Sci. (Med.), Associate Professor of Pathological Anatomy Department

Omsk

https://orcid.org/0000-0001-7200-7082МозговойС. И.MozgovoiS. I.

Мозговой Сергей Игоревич – д-р. мед. наук, профессор кафедры патологической анатомии

Омск

Sergei I. Mozgovoi – Doct. Sci. (Med.), Professor of Pathological Anatomy Department

Omsk

https://orcid.org/0000-0001-8607-7831КононовА. В.KononovA. V.

Кононов Алексей Владимирович – д-р. мед. наук, профессор, зав. кафедрой патологической анатомии

Омск

Aleksei V. Kononov – Doct. Sci. (Med.), Professor, Head of Pathological Anatomy Department

Omsk

Омский государственный медицинский университетOmsk State Medical University2024200120251345560Copyright © Рубцов В.А., Парыгина М.Н., Поморгайло Е.Г., Шиманская А.Г., Мозговой С.И., Кононов А.В., 20252025Рубцов В.А., Парыгина М.Н., Поморгайло Е.Г., Шиманская А.Г., Мозговой С.И., Кононов А.В.Rubtsov V.A., Parygina M.N., Pomorgailo E.G., Shimanskaya A.G., Mozgovoi S.I., Kononov A.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://anatomy.elpub.ru/jour/article/view/2026

Участие белка PDCD4 в молекулярных механизмах, имеющих ключевое значение в канцерогенезе, делает оценку уровня его синтеза в тканях важной для ранней диагностики злокачественных опухолей. Цель исследования – разработать способ оценки результатов иммуногистохимической окраски белка PDCD4. Материал и методы. Материалом для исследования служили 49 образцов ткани аденокарциномы желудка человека и 80 случаев эндоскопического биопсийного исследования слизистой оболочки желудка пациентов с диспептическими жалобами. Морфологические изменения в биоптатах соответствовали хроническому гастриту с разной степенью выраженности воспаления. Для выявления белка PDCD4 иммуногистохимическим методом использовали кроличьи моноклональные анти-PDCD4 антителами (клон EP 102, «abcam», США) и систему детекции («Diagnostic BioSystems», США). Результаты. В рамках представленной работы был разработан метод полуколичественной визуальной оценки синтеза регуляторного белка PDCD4 в гистологических срезах ткани иммуногистохимическим методом с определением его в ядре и цитоплазме. Для этого рассчитывают индекс экспрессии PDCD4 в тканях при суммировании экспрессии в ядрах и в цитоплазме. Ядерная экспрессия представляет собой перемножение частоты окрашивания ядер (0–3 балла) и полуколичественной визуальной оценки интенсивности окрашивания ядер (0–3 балла). Цитоплазматическая экспрессия представляет собой полуколичественную визуальную оценку интенсивности окрашивания цитоплазмы (0–3 балла). Заключение. Предложенный метод позволяет с большей чувствительностью и специфичностью оценить синтез регуляторного белка PDCD4 в тканях, что дает возможность обнаруживать нарушение экспрессии PDCD4 в эпителиальных клетках на ранних этапах опухолевой трансформации клетки. 

The participation of PDCD4 protein in molecular mechanisms of key importance in carcinogenesis makes the assessment of the level of its synthesis in tissues important for assessing the early diagnosis of malignant tumors. The aim of the presented study was to develop a method for evaluation of the results of immunohistochemical staining of the PDCD4 protein. Material and methods. The material for the study included 49 samples of human gastric adenocarcinoma tissue and 80 cases of endoscopic biopsy examination of the gastric mucosa of patients with dyspeptic complaints. Morphological changes in biopsies corresponded to chronic gastritis with varying degrees of inflammation. Rabbit monoclonal anti-PDCD4 antibodies (clone EP 102, abcam, USA) and a detection system (Diagnostic BioSystems, USA) were used to detect PDCD4 protein by immunohistochemical method. Results. The developed can be used for semi-quantitative visual assessment of synthesis of regulatory protein PDCD4 in histological sections of tissue by immunohistochemical method with detection in nucleus and cytoplasma. That is ensured by calculating an expression index of PDCD4 in tissues when summing up the nuclei expression and cytoplasm expression. Nuclear expression represents a product of staining frequency of nuclei (0–3 points) and semi-quantitative visual assessment of intensity of coloring nuclei (0–3 points). Cytoplasmic expression represents semi-quantitative visual assessment of intensity of cytoplasm (0–3 points). Conclusion. The proposed method makes it possible to evaluate the synthesis of the PDCD4 regulatory protein in tissues with greater sensitivity and specificity, which makes it possible to detect a violation of PDCD4 expression in epithelial cells at the early stages of tumor cell transformation.

белок PDCD4иммуногистохимический методканцерогенезprotein PDCD4immunohistochemical methodcarcinogenesisReferencesМозговой С.И., Кононов А.В., Рубцов В.А., Грищенко Р.К., Парыгина М.Н., Керученко М.А. и др. Патент РФ № 2711621; 2020.Mozgovoi S.I., Kononov A.V., Rubtsov V.A., Grishchenko R.K., Parygina M.N., Keruchenko M.A. et al. Patent RF № 2711621; 2020. (in Russ.).Azzoni L., Zatsepina O., Abebe B., Bennett I.M., Kanakaraj P., Perussia B. Differential transcriptional regulation of CD161 and a novel gene, 197/15a, by IL-2, IL-15, and IL-12 in NK and T cells. J Immunol. 1998 Oct 1;161(7):3493-500.Azzoni L., Zatsepina O., Abebe B., Bennett I.M., Kanakaraj P., Perussia B. Differential transcriptional regulation of CD161 and a novel gene, 197/15a, by IL-2, IL-15, and IL-12 in NK and T cells. J Immunol. 1998 Oct 1;161(7):3493-500.Lee S., Bang S., Song K., Lee I. Differential expression in normal-adenoma-carcinoma sequence suggests complex molecular carcinogenesis in colon. Oncol Rep. 2006;6:747- 754.Lee S., Bang S., Song K., Lee I. Differential expression in normal-adenoma-carcinoma sequence suggests complex molecular carcinogenesis in colon. Oncol Rep. 2006;6:747- 754.Li Y., Wang X., Wang Lu., Liu Y., Shi Y., Zhang L., Fang Z., Wei Z. PDCD4 suppresses proliferation, migration and invasion of endometrial cells by inhibiting autophagy and NF-κB/MMP2/MMP9 signal pathway. Biol Reprod. 2018;99(2):235-247. DOI: 10.1093/biolre/ioy052.Li Y., Wang X., Wang Lu., Liu Y., Shi Y., Zhang L., Fang Z., Wei Z. PDCD4 suppresses proliferation, migration and invasion of endometrial cells by inhibiting autophagy and NF-κB/MMP2/MMP9 signal pathway. Biol Reprod. 2018;99(2):235-247. DOI: 10.1093/biolre/ioy052.Liu Y., Sun H., Mao H., Gao M., Tan X., Li Y., Muloye G.M., Zhang L., Wang X., Wei Z. Expression of tumor suppressor programmed cell death 4 in endometrioid endometrial carcinomas and clinicopathological significance. Oncol Lett. 2018;15(6):9369-9376. DOI: 10.3892/ol.2018.8517.Liu Y., Sun H., Mao H., Gao M., Tan X., Li Y., Muloye G.M., Zhang L., Wang X., Wei Z. Expression of tumor suppressor programmed cell death 4 in endometrioid endometrial carcinomas and clinicopathological significance. Oncol Lett. 2018;15(6):9369-9376. DOI: 10.3892/ol.2018.8517.Ma G., Guo K.J., Zhang H. Ozaki I., Matsuhashi S., Zheng X.Y., Dong M. Expression of programmed cell death 4 and its clinicopathological significance in human pancreatic cancer Oncol Rep. 2005;25:597-600.Ma G., Guo K.J., Zhang H. Ozaki I., Matsuhashi S., Zheng X.Y., Dong M. Expression of programmed cell death 4 and its clinicopathological significance in human pancreatic cancer Oncol Rep. 2005;25:597-600.Matsuhashi S., Yoshinaga H., Yatsuki H., Tsugita A, Hon K. Isolation of a novel gene from a human cell line with Pr-28 MAb which recognizes a nuclear antigen involved in the cell cycle. Res Commun Biochem Cell Mol Biol. 1997;1:109-120.Matsuhashi S., Yoshinaga H., Yatsuki H., Tsugita A, Hon K. Isolation of a novel gene from a human cell line with Pr-28 MAb which recognizes a nuclear antigen involved in the cell cycle. Res Commun Biochem Cell Mol Biol. 1997;1:109-120.Nakashima M., Hamajima H., Xia J., Iwane S., Kwaguchi Y., Eguchi Y. et al. Regulation of tumor suppressor PDCD4 by novel protein kinase C isoforms. Biochim Biophys Acta. 2010;803(9):1020-1027. DOI: 10.1016/j.bbamcr.2010.05.002.Nakashima M., Hamajima H., Xia J., Iwane S., Kwaguchi Y., Eguchi Y. et al. Regulation of tumor suppressor PDCD4 by novel protein kinase C isoforms. Biochim Biophys Acta. 2010;803(9):1020-1027. DOI: 10.1016/j.bbamcr.2010.05.002.Shibahara K., Asano M., Ishida Y., Aoki T., Koike T., Honjo T. Isolation of a novel mouse gene MA-3 that is induced upon programmed cell death. Gene. 1995;166:297-301. DOI: 10.1016/0378-1119(95)00607-9.Shibahara K., Asano M., Ishida Y., Aoki T., Koike T., Honjo T. Isolation of a novel mouse gene MA-3 that is induced upon programmed cell death. Gene. 1995;166:297-301. DOI: 10.1016/0378-1119(95)00607-9.Vikhreva P.N., Kalinichenko S.V., Korobko I.V. Programmed cell death 4 mechanism of action: The model to be updated? Cell Cycle. 2017;16(19):1761-1764. DOI: 10.1080/15384101.2017.1371881.Vikhreva P.N., Kalinichenko S.V., Korobko I.V. Programmed cell death 4 mechanism of action: The model to be updated? Cell Cycle. 2017;16(19):1761-1764. DOI: 10.1080/15384101.2017.1371881.Vogel U. Overview on Techniques to Construct Tissue Arrays with Special Emphasis on Tissue Microarrays. Microarrays. 2014;3:103-136. DOI: 10.3390/microarrays3020103.Vogel U. Overview on Techniques to Construct Tissue Arrays with Special Emphasis on Tissue Microarrays. Microarrays. 2014;3:103-136. DOI: 10.3390/microarrays3020103.Wen Y.H., Shi X., Chiriboga L., Matsahashi S., Yee H., Afonia O. Alterations in the expression of PDCD4 in ductal carcinoma of the breast. Oncol Rep. 2007;186:1387-1393.Wen Y.H., Shi X., Chiriboga L., Matsahashi S., Yee H., Afonia O. Alterations in the expression of PDCD4 in ductal carcinoma of the breast. Oncol Rep. 2007;186:1387-1393.Yoshinaga H., Matsuhashi S., Fujiyama C., Masaki Z. Novel human PDCD4 (H731) gene expressed in proliferative cells is expressed in the small duct epithelial cells of the breast as revealed by an antiH731 antibody. Pathol Int. 1999;49:1067-1077. DOI: 10.1046/j.1440-1827.1999.00995.x.Yoshinaga H., Matsuhashi S., Fujiyama C., Masaki Z. Novel human PDCD4 (H731) gene expressed in proliferative cells is expressed in the small duct epithelial cells of the breast as revealed by an antiH731 antibody. Pathol Int. 1999;49:1067-1077. DOI: 10.1046/j.1440-1827.1999.00995.x.Yu H., Zeng J., Liang X., Wang W., Zhou Y., Sun Y., Liu S., Li W., Chen C., Jia J. Helicobacter pylori promotes epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer by downregulating programmed cell death protein 4 (PDCD4). PLoS One. 2014;9(8):105-116. DOI: 10.1371/journal.pone.0105306.Yu H., Zeng J., Liang X., Wang W., Zhou Y., Sun Y., Liu S., Li W., Chen C., Jia J. Helicobacter pylori promotes epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer by downregulating programmed cell death protein 4 (PDCD4). PLoS One. 2014;9(8):105-116. DOI: 10.1371/journal.pone.0105306.Zhang H., Ozaki I., Mizuta T. Hamajima H., Yasutake T., Eguchi H., Ideguchi H., Yamamoto K., Matsuhashi S. Involvement of programmed cell death 4 in transforming growth factor-β1- induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma. Oncogene. 2006;25:6101-6112. DOI: 10.1038/sj.onc.1209634.Zhang H., Ozaki I., Mizuta T. Hamajima H., Yasutake T., Eguchi H., Ideguchi H., Yamamoto K., Matsuhashi S. Involvement of programmed cell death 4 in transforming growth factor-β1- induced apoptosis in human hepatocellular carcinoma. Oncogene. 2006;25:6101-6112. DOI: 10.1038/sj.onc.1209634.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.